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Elisa試劑盒檢測原理

 更新時(shí)間:2021-09-26 點(diǎn)擊量:1501

Elisa生物檢測是一種敏感度高,同時(shí)特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)檢測方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。


目前市面上的Elisa試劑盒檢測原理主要有以下四種:直接法,間接法,夾心法,競爭法。

Elisa試劑盒評價(jià)標(biāo)準(zhǔn):

① 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,應(yīng)大于等于0.9900。

② 靈敏度:反應(yīng)試劑盒的檢測濃度最小值

③ 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

④ 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)

⑤ 回收率:判斷實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和特異性

Elisa試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線:

標(biāo)曲R值是幾個(gè)9才合格?

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按檢測標(biāo)準(zhǔn)(方法)的要求使用標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。所用標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)覆蓋被測樣品的濃度范圍。檢測標(biāo)準(zhǔn)(方法)如無具體的要求,至少使用5個(gè)標(biāo)樣(除空白外)建立線性標(biāo)準(zhǔn)曲線,每個(gè)點(diǎn)重復(fù)測定1-3次,對于篩選方法,線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98,對于確證方法,相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99。

其實(shí),大于0.99是判斷是否為線性相關(guān)的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn),實(shí)際應(yīng)用中線性大于0.999才是比較理想的。線性在0.99到0.999之間的監(jiān)測結(jié)果只用接近最高濃度一半(中間濃度)的位置才比較準(zhǔn)確,如果線性大于0.999的話,在整個(gè)線性范圍內(nèi)都會(huì)有一個(gè)比較滿意的結(jié)果。

如果檢測的線性不好,可以減少標(biāo)準(zhǔn)的覆蓋范圍,將標(biāo)準(zhǔn)的濃度調(diào)整到待測樣品濃度附近,這樣結(jié)果也是非常準(zhǔn)確的。例如,樣品的濃度約20ppb,但在0~50ppb范圍建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,但線性非常不理想,這時(shí)可以將標(biāo)準(zhǔn)范圍調(diào)整到15~25ppb之間,作五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。

可以檢測檢測各類食品,飼料,組織及生物液體中真菌毒素、抗生素、食品添加劑以及其他細(xì)菌蛋白的ELISA試劑盒:

1.抗生素類:氨芐青霉素,貨號:E4350,樣本:血清,尿液,牛奶,組織

檢測食品中抗生素的殘留

樣本類型:組織、血清、牛奶、雞蛋和其他生物樣本

真菌毒素是真菌產(chǎn)生的低分子量次級代謝產(chǎn)物

2.真菌毒素:總黃曲霉毒素,貨號:E4747,樣本:酒、醬油、醋、谷物、花生、配方飼料、食用油

樣品類型:玉米、谷物、花生、大米、大豆等。

食品受到生物和環(huán)境污染物的污染發(fā)生在生產(chǎn)和加工的幾個(gè)階段

3.食品添加劑: 沙丁胺醇,貨號:K4209,樣本:豬尿、組織、飼料

樣品類型:牛奶、肉類、玉米、谷物、花生、大米、大豆,等。

表達(dá)蛋白經(jīng)過幾個(gè)純化步驟后,宿主細(xì)胞蛋白仍然可以以較高濃度存在,甚至?xí)c原料藥一起純化和濃縮;樣品類型:細(xì)胞裂解液、其他生物液

4.宿主細(xì)胞蛋白:CHO 宿主細(xì)胞蛋白,貨號:E4537,樣本:細(xì)胞裂解液,其他生物液體

5.其他毒素:雙酚A(BPA),E4722,樣本:細(xì)胞裂解液,其他生物液體


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